[실험레포트] 미생물 실험 배양방법에 대한 예비와 결과 레포트.hwp |
본문 미생물의 배양(MacConky agar plate) 미생물의 배양의 다양한 방법과 도말 평판 배양 실험 미생물은 주위 환경, 즉 공기, 실험실의 실험대, 기계 및 기재, 실험하는 사람의 여러 신체 부위에 존재하며 이런 것이 오염원으로 작용할 수 있다. 균을 접종 또는 이식하는 과정에서, 외부로부터 균이 오염되어 순수균주가 혼합균주로 바뀔 수도 잇기 때문에 균 이식과정 중의 무균조작은 필수적이다. 미생물의 배양이란 온도나 산소 등의 적당한 조건 하에서 목적으로 하는 미생물을 증식시키는 것이며 미생물의 연구 또는 발효공업에 있어서는 불가결의 조작이다. 이때 목적하는 이외의 미생물이 오염되지 않게 세심한 주의를 하지 않으면 안 된다. 배양을 목적에 따라 보면 미생물의 분류나 동정을 위하여 행하는 경우와 미생물의 생리적, 생화학적 연구나 생산물의 취득을 위하여 행하는 배양으로 대별할 수 있다. 미생물은 증식하기 위하여 산소를 필수로 하는 절대 호기성균, 산소가 있으면 증식되지 않는 절대 혐기성균 그리고 산소의 유무에 관계없이 증식되는 통성 혐기성균으로 분류된다. 배양 형식의 면에서 대별되면 산소공급을 필요로 하는 호기배양과 산소가 없는 조건하에서 배양하는 혐기배양으로 대별된다. 또 산소원, 질소원, 무기염류 등의 영양원을 함유한 액체배지를 사용하여 미생물을 생육시키는 액체배양과 적당한 수분을 함유한 고체배지의 표면에 균을 생육시키는 고체배양으로 나눈다. 고체배양에는 미생물의 보존이나 관찰에 사용되는 사면배양, 천자배양, 고층배양이 있고, 한천이나 gelatin을 겔화제로서 첨가한다. 밀기울배양은 고체배양의 일종으로 Aspergillus oryzae 등의 곰팡이의 배양에 알맞고 이 방법으로 amylase등의 생산이 이루어지고 있다. 또 청주, 된장, 간장 등의 양조식품 공업에 있어서 국의 생산도 고체배양이다. 액체배양에는 정치배양, 진탕배양과 통기교반배양 등이 있다. 정치배양은 글자 그대로 배지를 정치한 그대로 배양하는 것으로 매생물의 호기성시험 등외에 청주, 간장, 식초등의 양조 식품의 제조에 일반적으로 널리 사용되는 방법이다. 진탕배양법은 호기성균을 액체 배지 중에서 균일하게 배양하는 호기배양법의 하나로 배지가 들어있는 배양용기를 진탕하여 산소공금을 하는 방법이다. 통기배양법은 액체 배지 중에 직접여과된 무균공기를 취입하면서 배양하는 것이고 항생물질이나 아니노산 생산을 비록하여 근대 발효공업의 불가결한 배양법이다. 통기 배양은 jar fermentor나 또는 이것을 대형으로 한 탱크 장치에서 행하여 통기량, 교반속도, 온도, pH 등을 정확하게 제어하는 것이 가능하다. 미생물을 배양하면 자신의 생산물에 의하여 생육저해를 받는 것이 있다. 젖산 발효나 초산발효가 그 대표적인 예이다. 최근 생산물에 의한 발효저해를 감소시키기 위한 배양법이 고안되었으면, 이를 전기투석배양법이라 부르고 있다. 이 배양법은 이온 교환막을 이용한 전기 투석장치를 배양계에 조립하여 저해를 일으키는 물질의 하전을 이용하여 배양액 중의 그 물질의 농도를 낮게 유지함으로써 그 저해를 경감하는 배양법이다. 젖산균은 혐기성균이므로 배양액을 혐기적 상태로 유지하기 위하여 음극조에 통한다. 젖산 이온은 부(-)로 하전하고 있으므로 음이온 교환막을 통하여 양극조 쪽으로 인장되지만 양이온 교환막을 통하기 어려우므로 음극조의 농축조에 축적된다. 이와 같이 하여 생산된 젖산은 배양액에서 연속적으로 제거되게 조립되어 있다. 전기투석배양법의 특징은 배양액에서 저해물질(젖산이나 초산)을 연속적으로 제거하여 배양액의 pH 저하를 막을 수 있다. 저해 물질 제거 결과 원하는 물질의 생산에 알맞은 pH를 유지시킬 수 있다. 이 결과 저해가 감소되어 배양시간의 단축과 미생물의 연명효과가 있다. 생산물을 거의 순수하게 회수 할 수 있다는 것 등을 들 수 있다. 미생물 배양에 있어서는 배지, 온도, 산소농도, 접종균(전배양), 배양시간 등의 선택이 중요하다. 생산물의 취득을 목적으로 사는 경우에는 여기에 더하여 배양 중의 안정성이나 생산물의 분리, 정제의 난이 등도 고려하여 최적조건이 결정된다. 또 균의 증식을 위한 최적조건과 생산물의 생산 등의 최적조건이 배양시간, 영양소의 요구, pH 등, 각종의 점에서 반드시 일치하지 않는 점에도 주의하여야 한다. 두종류 이상의 균을 함께 배양하는 것을 혼합배양이라고 하며 한 종의 균을 배양하는 것을 순수 배양이라고 한다. 현미경의 의한 연못물이나 생우유와 같은 자연환경으로부터 얻어지는 물질의 관찰은 미생물이 거의 순수배양으로 존재하지 않음을 보여준다. 그러므로 원하는 특정 균을 얻고자 할 때는 다른 균으로부터 필요한 균만을 따로 분리하여 순수 배양하여야 한다. 일반적으로 고체 평판 배지를 써서 한 가지 종류의 미생물만 포함하게, 고립된 콜로니를 만들어 이것을 선택하여 순수한 새 배지에 옮기는 것이다. 혼합물로부터 순수배양하는 방법에는 도말평판법(streak plate 또는 Spread plate method), 주입 평판 배양법(혼합 희석 평판 배양법이라고도 한다,Pour plate method)이 있다. 도말 평판법은 감수성이 있는 종속 영양 세균이나 저온 세균, 호기성 세균에 많이 사용되는 방법으로, 미리 페트리접시에 평판배지를 만들어 놓고, 세균은 한천 층의 표면과 안쪽에서 집락(colony)의 형태를 만드는 방법이다. 하고 싶은 말 좀 더 업그레이드하여 자료를 보완하여, 과제물을 꼼꼼하게 정성을 들어 작성했습니다. 위 자료 요약정리 잘되어 있으니 잘 참고하시어 학업에 나날이 발전이 있기를 기원합니다 ^^ 구입자 분의 앞날에 항상 무궁한 발전과 행복과 행운이 깃들기를 홧팅 키워드 배양, 미생물, 배지, 배양법, 산소, 물질 |
2019년 2월 2일 토요일
실험레포트 미생물 실험 배양방법에 대한 예비와 결과 레포트
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